基督教的知名人士為狄奧多西的統治增添光彩。格列高利·納齊安贊是才幹出眾、能言善道的傳道者；圖爾的馬丁以其非凡的天賦，更增添了他作為修道士的美德。 但是神職人員中精力最充沛、才智最高的冠冕，仍非堅忍不拔的安布羅斯莫屬。 他出身羅馬貴族家庭，父親曾擔任高盧禁衛軍統領要職；他經過一段自由教育的學習時光後，通過幾次正常的晉陞，獲得利古里亞省長的職位，這個行省包括宮廷所在地米蘭在內。他在34歲正式受洗以前，出乎所有人意料，突然從省長改任大主教，正如一般人所知的那樣，這其中絲毫不摻任何手腕和陰謀。全體人民異口同聲認為這一宗教頭銜他實至名歸；他們這種統一的恆久不變的擁護態度，人們認為是出於某種超自然力量的影響。雖然說從他過去生活中的習慣和職務來看，這位文職官員毫無準備，但還是勉強自己接受了宗教職位。他積極進取的才能，很快使他能夠以充滿熱情和審慎的態度，負起教會的統轄權。他一方面欣然拋棄世俗種種華而不實的高貴排場，另一方面為了教會的利益，指引皇帝不要偏離自己的良心，進而掌控帝國的行政事務。
格拉提安像對待父親那樣敬愛他，那篇論三位一體信仰的長文便是專為教導這位年輕的君王而作。等到皇帝悲慘死去，當皇后賈斯蒂娜為自身和兒子瓦倫提尼安的安全而驚慌失措、膽戰心驚時，安布羅斯以米蘭大主教的身份，兼任兩個不同的大使職位，被派往特里夫。他以同樣的堅定態度和巧妙手段，行使他的宗教和政治權力，儘可能運用自己的威望和才氣，制止馬克西穆斯的野心，保障義大利的和平。 安布羅斯把畢生精力都貢獻給教會事業，他藐視財富，放棄自己世襲的家產，為了贖回俘虜，毫不猶豫賣掉敬神用的金銀器具。米蘭的教士和人民都熱愛他們的大主教，就是軟弱的君主也對他極為尊敬，他真可以說是受之無愧。他從未向瓦倫提尼安二世祈求給予恩惠，也從來不怕觸怒皇帝。
這位年輕皇帝以及義大利的政權，自然都落到了他母親賈斯蒂娜手裡。她是一個美麗而精明的女性，雖然身處正教人士之中，可惜卻信奉阿里烏斯派的邪說，還極力想把她的信仰灌輸給孝順的兒子。賈斯蒂娜認為，羅馬皇帝有權在統治地區向公眾推行自己所信的宗教，因而她做出了一個溫和而合理的讓步，向大主教提出要求，不論在米蘭城內和郊區，放棄只容許單一教會存在的做法。但是安布羅斯的行事準則和這種要求截然不同， 他認為世上的宮殿全歸愷撒所有，然而教堂卻是上帝的聖所。而且在他的教區範圍之內，他本人作為使徒的合法繼承人，是上帝的唯一侍者。基督教所具有的一切權利，無論是世俗或宗教方面，只屬於真正的信徒所有。安布羅斯認為自己的神學觀點，代表著正統教會的真理標準，立場非常堅定，身為大主教絕不會與撒旦的爪牙舉行會議和談判，同時相當執著地宣稱，他寧可殉教死去，也不願與褻瀆神明的罪惡行為妥協。
賈斯蒂娜把他的拒絕看成是無禮和犯上，感到極為不滿，便匆忙決定要行使兒子的君王權力。她希望在復活節即將來臨之際，公開對民眾展現信仰的熱忱，下令安布羅斯要在宗教會議上接受審訊。大主教按照一個臣民應遵守的本分，非常順服地接受召喚，但卻有無數的群眾未經同意跟著一起到來，情緒激昂，推擠著皇宮大門。瓦倫提尼安手下的大臣一時手足無措，不禁驚恐萬分，在這種狀況下不敢對米蘭大主教判處流放，反而要低聲下氣求他挺身而出，用威望來保護皇帝的安全，恢複都城的平靜。安布羅斯把得到的承諾，轉達給在場的民眾，但卻很快為不講信用的宮廷所推翻。每年這段時間原本是虔誠基督徒用於宗教活動的最莊嚴的日子，現在全部陷於狂熱和騷亂的強烈震撼之中，前後足足有8天之久（公元385年4月3日至4月10日）。皇家的官員奉命立即將皇帝和他的母親接到波提安，後來又遷移到巴西里卡。皇帝的御駕按照禮儀要加上金飾的頂蓋，四周掛上華麗的帷幔，但是官員馬上發現，必須派出強大的衛隊嚴密戒備，才能使皇室免於群眾的侮辱行動。阿里烏斯教派的基督徒要是敢在街上行走，就會隨時面臨極大的生命危險。這時安布羅斯不計前嫌，把仇敵從憤怒的群眾手中救出來，並深以自己具有這種能力和威望而備感欣慰。
安布羅斯雖儘力阻止人們的宗教狂熱，以免造成嚴重後果，但他那沉痛而令人激動的佈道演說，卻在不斷煽起米蘭人民的義憤和叛亂情緒。人民說賈斯蒂娜的個性就像是夏娃、約伯的妻子、耶洗別、希羅底， 這些不敬的言辭全被胡亂加在皇帝母親的頭上。她企圖為阿里烏斯派建立一所教堂的願望，也被人拿來與在異教統治時期，基督教所遭受最殘酷的迫害相比。宮廷採取的應對措施，更向人顯示出動亂的規模實在非常巨大。商會和製造商的法人團體，被處以200磅黃金的罰款。用皇帝的名義向司法機關和工作人員發布命令，要他們在社會騷動結束前不得離家外出。瓦倫提尼安的大臣非常愚昧地公開宣告，米蘭絕大多數體面的市民，全部支持大主教的作為。這時安布羅斯又受到政府的請求，應遵照君主的意願，使國家恢複和平。儘管他用最恭敬的言辭回覆，弦外之音竟也被解釋為嚴重的內戰宣言：
雖然他的生命和榮辱完全操在皇帝之手，但他不會背叛耶穌的教會，損害他神聖的尊嚴。為了這項事業他已準備承受魔鬼所能加之於他的一切災難，唯一的願望就是能死在虔誠民眾的面前，長眠在聖壇底下。他並沒有挑起人們的憤怒，只有上帝的力量能使它平息。他絕不願看到發生流血和混戰的場面，只能很虔誠地祈禱，希望自己在活著時，不要看見繁榮的城市變成廢墟，整個義大利殘破成一片荒野。
執迷不悟的賈斯蒂娜對抗教會和米蘭的人民，要是有一支唯命是從的皇家軍隊可以運用，必然會使其子統治的帝國受到極大的危害。原本有一大隊哥特人的兵馬開過來，想要佔領巴西里卡。從阿里烏斯派的行事原則和外國傭兵的蠻族習性而言，讓他們去執行殘暴的命令，他們一定會遵照辦理，這是意料中事。大主教與派來的人馬在神聖的教堂門口相遇，他用雷鳴般的聲音，大聲宣布要將他們逐出教會，同時用父執和主子的口吻質問，他們雖被請來保護共和國，難道就是為了侵犯上帝的聖所嗎？蠻族的遲疑不決，使他爭取到幾個小時，能夠做進一步的談判。皇太后終於接受身邊明智謀士的建議，同意正統基督教會擁有米蘭所有教堂，她本人也暫時中止了報復的念頭，等候適合的時機。瓦倫提尼安的母后永遠不會原諒安布羅斯的勝利，年輕的皇帝在衝動之下也不禁大聲說，就是身旁信得過的奴僕，也會隨時把他出賣給那位專橫的教士。
帝國的法令規章，甚至有些附有瓦倫提尼安簽署的敕令，仍然譴責阿里烏斯派的異端邪說，似乎原諒了正統教會的抗拒行動。在賈斯蒂娜的操控之下，對隸屬米蘭宮廷的行省頒布信仰寬容的詔書，讓承認里米尼信條的教徒，獲得全部的宗教自由。同時皇帝宣布，凡是違反這條有益社會大眾的神聖法令，就會被視為破壞公共和平的敵人，要處以極刑，絕不寬恕。米蘭大主教的性格和言論始終被敵人緊緊盯住，希望他的行為會犯下錯誤，尤其有的法令曖昧不清而且帶有暴力的血腥性質，更是容易觸犯。阿里烏斯派趁機對他進行打擊，他的行為很快給了阿里烏斯派一個合法的理由，或者是一個借口，他違反了制定的那條奇怪的暴力血腥的律法。他被判處流放，根據公布的判決書，安布羅斯可以自己選擇流放的地點和陪同人員的數目，但必須立即離開米蘭。然而對安布羅斯來說，宣講並實踐絕對忠誠原則的聖徒權威，與教會所面臨的迫在眼前的危險相比，那真是算不了什麼。於是他勇敢站出來拒絕服從法庭的命令，這得到虔誠民眾一致的支持。大家輪班保護大主教，嚴密把守著大教堂和聖殿的大門。帝國軍隊實施封鎖，卻不願冒險攻打堅不可摧的堡壘。大批貧苦的民眾受過安布羅斯的慷慨施捨，正好利用這個機會表達宗教熱忱和感恩情懷。大主教考慮到長時期單調的守夜活動，會慢慢使人失去耐心，很明智地建立了一個產生很大作用的制度，就是在米蘭大教堂定時大聲朗讀聖詩。
他在這場全力以赴的艱苦鬥爭期間，有次在睡夢中得到啟示，告訴他在某處地方挖掘，便能找到熱爾瓦修斯和普羅塔休斯兩位聖徒的遺骸。 之後，他果然在教堂里鋪著磚石的地面下，挖出兩具完整無缺的骨骼，頭顱與身體分離，上面有流血的痕迹。他舉行嚴肅的儀式將這兩具聖骸展示出來，供群眾瞻仰膜拜。安布羅斯利用這次的時機，安排有利於推行計畫的相關細節。殉教者的骨骼和寶血，甚至他們的衣物，都被大眾認為具有醫療效用，不論把遺物拿到多遠的地方，這種神奇的功效仍然存在，不受絲毫影響。有一個盲人很奇妙地被治癒， 還有幾個被魔鬼附身的人，雖然他們不願詳述這段經過，但都可證實安布羅斯虔誠的信念，神聖的遺物也絕非虛假。至於這些神跡的真實性，安布羅斯本人和秘書保利努斯、大批皈依的教徒，